細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個不可少的過程，是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長增殖等。

體外培養(yǎng)高度依賴培養(yǎng)體系與培養(yǎng)環(huán)境，本期內(nèi)容為大家解析，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)體系中的培養(yǎng)環(huán)境的關(guān)鍵要素。

01

細(xì)胞培養(yǎng)塑料耗材

隨著相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，不同種類的的塑料逐漸用于細(xì)胞培養(yǎng)和基于細(xì)胞的檢測。

大多數(shù)脊椎動物細(xì)胞均具有貼壁依賴的特質(zhì)，因此需要對培養(yǎng)器皿表面進(jìn)行特殊處理，以便細(xì)胞附著和生長。

常用的細(xì)胞培養(yǎng)器皿有以下幾類：

培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)瓶大小為12.5 cm^2到300 cm^2 不等，有直頸、彎頸兩種。

彎頸培養(yǎng)瓶的的使用更為普遍：操作更簡便，實驗者更容易接觸到整個生長表面；操作更安全，防止培養(yǎng)基接觸到蓋子，并允許從培養(yǎng)瓶中倒出培養(yǎng)基且減少滴落。

培養(yǎng)皿

一次性的專門設(shè)計用于支持培養(yǎng)細(xì)胞的生長和繁殖的淺容器。尺寸選擇也很多，可清除地在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。配有蓋子，提供連續(xù)的氣體交換與環(huán)境保護(hù)。

孔板

細(xì)胞培養(yǎng)板的孔數(shù)從4個到384個不等，可一次用于多種培養(yǎng)。

滾瓶

滾瓶更適合疫苗工業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)、單克隆抗體和生物治療等應(yīng)用。與培養(yǎng)瓶相比，滾瓶具有更大的生長表面

腔式載玻片

腔式載玻片包含一個可拆卸的培養(yǎng)基腔室，實驗人員可以在單獨的顯微鏡載玻片上對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行接種、培養(yǎng)等操作。

02

pH值

大多數(shù)正常的哺乳動物細(xì)胞系都能在pH值為7.4的環(huán)境中生長良好，而且不同細(xì)胞 株間差異也并不大。

后來研究發(fā)現(xiàn)，有些轉(zhuǎn)化細(xì)胞系在略微偏酸性的環(huán)境（pH 7.0-7.4）中也能較好生長；而有些成纖維細(xì)胞系則更適合在略微偏堿性的環(huán)境（pH7.4-7.7）中生長；而某些昆蟲細(xì)胞系在pH值為6.2的環(huán)境中生長情況更佳。

03

二氧化碳

細(xì)胞培養(yǎng)基中的一些成分，可以控制培養(yǎng)體系中的pH值，提供緩沖作用。一般情況下，該緩沖作用通過添加有機(jī)緩沖液（HEPES）或者碳酸氫鹽緩沖液實現(xiàn)。

溶解態(tài)二氧化碳與碳酸氫根間的平衡，決定了培養(yǎng)基的pH值，因此，培養(yǎng)環(huán)境中空氣中二氧化碳的含量變化，也會改變培養(yǎng)基的pH值。為此，使用含碳酸氫鹽緩沖液的培養(yǎng)基時，需配合使用外源性二氧化碳。

04

溫度

某種細(xì)胞體外培養(yǎng)時所需適宜溫度，主要取決于該供體物種的體溫，以及解剖部位體溫（同一物種不同組織培養(yǎng)溫度可能不同）。通常情況下，高溫對細(xì)胞培養(yǎng)的影響大于低溫。總的來說，溫度控制建議在以下范圍：

1、大多數(shù)人類和哺乳動物細(xì)胞系在36°C——37°C下具有比較好的生長狀態(tài)。

2、昆蟲細(xì)胞在27°C下培養(yǎng)狀態(tài)較好；它們在高于或低于該溫度，生長較慢。當(dāng)培養(yǎng)溫度高于30°C時，會降低昆蟲細(xì)胞的存活率。

3、禽類細(xì)胞系則需要38.5°C可實現(xiàn)更好的生長。

4、源自冷血動物，比如兩棲類生物，冷水生活的魚類的細(xì)胞系，適宜生長的溫度則更寬，15°C至26°C范圍內(nèi)，均有比較好的生長狀況。

?

好物推薦

體外細(xì)胞的高效培養(yǎng)，除了適宜的培養(yǎng)環(huán)境，優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)體系也至關(guān)重要。

選擇一款高質(zhì)量的血清產(chǎn)品，盡可能降低外源物質(zhì)的的干擾，為細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)。Ausbian品牌系列血清，精選內(nèi)毒素更低的批次，通過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，各類微生物檢測結(jié)果均是未檢出，為細(xì)胞的體外培養(yǎng)保駕護(hù)航。