你最好做到每天都去探望探望它們，看看他們的成長(zhǎng)情況

1、檢查培養(yǎng)液顏色與透明度的變化，顏色變黃，說明PH值下降;變紅或紫紅色，說明PH值上升，細(xì)胞生長(zhǎng)停滯、死亡，一般生長(zhǎng)穩(wěn)定的細(xì)胞2-3天換液一次，生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞可3-4天換液一次。

2、觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底的80%，應(yīng)及時(shí)傳代。

3、觀察細(xì)胞形態(tài)變化，細(xì)胞透明度大、折光性強(qiáng)、輪廓清晰為佳。

4、注意微生物污染，常常出現(xiàn)培養(yǎng)液混濁，液體內(nèi)漂菌絲或細(xì)胞菌，不僅僅指微生物，包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物及細(xì)胞。

你培養(yǎng)的細(xì)胞被污染了，無非是下面幾個(gè)污染途徑：

1、空氣是微生物傳播的最主要途徑，操作時(shí)盡量避免說話、咳嗽、打噴嚏;

2、使用的培養(yǎng)器械及器皿清洗消毒不*;

3、培養(yǎng)兩種以上細(xì)胞時(shí)，操作不規(guī)范，可能導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染;

4、血清有問題，可能血清在生產(chǎn)時(shí)就已經(jīng)被支原體或病毒污染;

5、原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來源于組織樣本。

這里的工作區(qū)域包括實(shí)驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、門把手等細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境。

使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體祛除噴霧或濕巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分鐘清除支原體，高效快速，操作方便。

產(chǎn)品特點(diǎn)及原理：

1）快速有效

噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。

與傳統(tǒng)的化學(xué)試劑熏蒸方法相比，更加安全；與傳統(tǒng)酒精處理、紫外線照射方法相比更有效！

2）廣譜抗菌

不僅能祛除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

3）無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分。

4）操作簡(jiǎn)便

即用型消毒液，可以快速簡(jiǎn)單地保持工作區(qū)的清潔干凈。

使用方法及步驟：

 

噴霧劑:

注：對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)箱，內(nèi)部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后，應(yīng)打開箱門通風(fēng)至少1小時(shí)。如培養(yǎng)箱帶熱滅活功能，可開啟該功能以替代風(fēng)干。

 

濕巾:

對(duì)于移液器，門把手，電子設(shè)備等，可使用支原體祛除濕巾。擦拭后，應(yīng)讓其被消毒物體的表面保持濕潤(rùn)，再讓其自然風(fēng)干。

培養(yǎng)箱水槽和水浴鍋中預(yù)防支原體污染的方法

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋經(jīng)常會(huì)有支原體以及各種細(xì)菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時(shí)，水槽中的水源即會(huì)成為細(xì)胞污染的重要來源。

保持水槽的潔凈，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的順利進(jìn)行非常重要。

眾多實(shí)驗(yàn)室日常都在使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的Water Shield支原體污染防護(hù)劑（水槽用）。Water Shield可持續(xù)作用四周，使水源避免受到支原體、細(xì)菌、酵母、霉菌和孢子的污染。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1）長(zhǎng)效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑，不易揮發(fā)，可持續(xù)作用4周。

2）安全。不含醛類或疊氮化物，對(duì)細(xì)胞無毒害。

3）廣譜。預(yù)防支原體、細(xì)菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。

4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

5）不產(chǎn)生水垢。

操作步驟：

1）Water Shield和蒸餾水可直接加入培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中。

2）Water Shield按1:200比例使用，例如：1000ml蒸餾水+5ml Water Shield，或10L蒸餾水+50ml Water Shield。

3）4周左右清洗水槽，換水，重新加入Water Shield。

 

注意事項(xiàng)：

避免吸入。眼睛接觸或長(zhǎng)時(shí)間皮膚接觸可能會(huì)產(chǎn)生刺激性。因而，使用試劑時(shí)應(yīng)戴上護(hù)目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。

Water Shield對(duì)玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好。